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TransIT-X2转染试剂--适用siRNA转染/miRNA转染/Cas9/gRNA 转染

作者:欣博盛生物科技有限公司 2023-05-17T14:29 (访问量:3038)

TransIT-X2® DYNAMIC DELIVERY SYSTEM


高效 — — 完美的广谱转染试剂

实用性广 — — 可以适合用于DNA质粒,siRNA/miRNA以及RNP复合物

科技 — — 非脂质体,阳离子聚合物递送

Mirus X2转染系统通过创新的聚合物体系有效地将DNARNA从核内体递送到细胞质中,克服了核酸递送的关键障碍。

如需购买Mirus转染试剂,请联系Mirus授权全国代理欣博盛生物。


TransIT-X2转染试剂

1.TransIT-X2® Dynamic Delivery System可在多种细胞类型中实现较高水平的基因表达

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000转染试剂(Thermo Fisher Scientific)试剂与DNA 3:1将编码荧光素酶的质粒DNA转染到41种不同的细胞类型中。使用标准荧光素酶测定法比较转染后24小时的荧光素素酶的表达。在优化比例下实验结果比较表明,使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在41种细胞类型中的36种细胞中的荧光素酶表达优于或者等于竞争品牌;在17种细胞中TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000表达水平的2倍,具体细胞在图中用表示。



TransIT-X2转染试剂

2. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System细胞中GFP表达水平较高

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)将编码EGFP的质粒DNA转染到A549CHO-K1HepG2LNCaPMDCKPC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和原代正常人真皮成纤维细胞(NHDF)。使用4-8μl TransIT-X2®MirusBio)递送2μg DNA。使用Zeiss Axiovert S100在转染后48小时拍照(32X)倒置荧光显微镜 *代表原代细胞。


TransIT-X2转染试剂

3.使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System在多个细胞系和原代细胞中的GFP转染效率较高

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)将编码EGFP的质粒DNA转染到A549CHO-K1Hep G2MDCKLNCaPPC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和原代正常人真皮成纤维细胞(NHDF)中。使用0.2-0.4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在96孔板中进行转染,以递送0.1μg DNA(转染试剂:DNA的比率2:13:14:1)。转染48小时后,用guava® easyCyte™ 5HT流式细胞仪(MilliporeSigma)对三个孔进行分析。 *代表原代细胞。


TransIT-X2转染试剂

4. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System转染质粒DNAsiRNA

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)将Cy®5标记的编码核YFP质粒DNACy®3标记的siRNA转染到HeLa细胞。使用4μL TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在6孔板中用聚-L-赖氨酸(PLL)涂层的盖玻片进行转染,以递送2μg DNA2:1试剂:DNA比)和25 nM siRNA。使用Alexa Fluor®350 PhalloidinThermo Fisher Scientific)对肌动蛋白细胞骨架进行染色。在转染后24小时使用Nikon A1R共焦显微镜拍摄图像(63X)。图像:黄色(核YFP)、蓝色(Cy®5标记的DNA)、红色(Cy™3标记的siRNA)、绿色(肌动蛋白细胞骨架)。


TransIT-X2转染试剂

5. TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000具有更高的敲除率

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000转染试剂(Thermo Fisher Scientific)用于转染靶向内源性蛋白GAPDHaha1siRNA,或在原代正常人真皮成纤维细胞(NHDF)中递送非靶向对照。根据说明书,使用4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)或6μl Lipofectamine®2000Thermo Fisher Scientific)和25nM siRNA6孔板中转染细胞。使用qRT-PCR测定GAPDHaha1mRNA相对于18S rRNA水平的量,然后在转染后48

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