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腺病毒上清感染使用说明书

作者:和元生物技术(上海)股份有限公司 2014-03-12T00:00 (访问量:6476)

 腺病毒病毒上清感染细胞的方案

 

第一天  目的细胞铺板(24孔板为例)

将细胞状态良好的目的细胞(293T细胞为例),用0.25%胰酶消化下来,把细胞浓度调整为3.0*105cells/孔接种于24孔板,按500ul/孔培养基加入。

接种目的细胞的数量因细胞生长速度而有所不同,一般保证在第二天进行病毒感染时细胞汇合度达到90%95%之间为宜。

第二天  病毒感染

1 计算所要添加的病毒量

Vml=MOI*细胞数量/病毒滴度

MOI=5,细胞数为3.0*105cells,病毒的滴度1.5*108ifu/ml为例

所需要加的病毒的体积为:

V=5*3.0*105cells/1.5*108

  = 1*10-2ml

备注:如果所加的病毒量低于2.0ul时,则需要稀释病毒原液后,再加病毒液体。

2 病毒感染

取出24孔板中旧培养基,加入无血清的含有所需要病毒量的培养基500ul400ul+100ul稀释的病毒液体)。

3 换液

感染实验同一天,2h后,弃去上清,换成10%血清的培养基,500ul/孔。

 

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